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超高液相色谱仪的简介

作者:wubaiyi     发表时间:2023-05-06 11:33:14

超高压液相色谱泵。
Waters公司有能力制造超高压泵。UNCGrove教授使用的超高压液相色谱泵是Waters公司专门为其制造的。除了密封和高压动力外,超高压色谱泵的主要问题是超高压溶剂的压缩和绝热。
ACQUITYUPLCTM配备了一个独立的柱塞驱动和四个溶剂切换的两元高压梯度泵。1ml/min流性可达1.5万psi,具有***可靠的梯度性能。新型超高压输液泵使独特的小颗粒填料技术能够在**流量下工作,充分发挥其特点。集成改进的真空脱气技术使四种流动相溶剂和两种进样器洗针溶剂同时脱气良好。梯度的再现性也很好。虽然保留时间在1min以内,但其再现性与HPLC的再现性相当。
自动进样器
为了减少死亡体积和交叉污染,自动进样器的设计采用了针内针样品探头(XYZZ)、压力辅助进样等多种新技术。所谓“针内针”XYZZ设计,实际上采用液相色谱管(PEEK材料)作为进样针,以减少死亡体积,而“外针”是一小段硬管,用于打破样品瓶盖。
在如此小的仪器系统体积下,重现进样是一项非常重要的措施。为了减少交叉污染,采减少交叉污染,采用了一强一弱的双溶剂进样针清洗步骤,这两种洗针溶剂也采取了脱气措施。
高速检测器
然而,在新色谱柱技术的支持下,高速UPLC对ACQUITYUPLCTM结果的检测提出了挑战。首先是速度问题。如此多的色谱峰需要在短时间内更快地适应数据采集速度,至少在10Hz以上,并减少样品在检测池中的停留时间。当然,与普通HPLC检测器一样,信噪比也是新检测器的目标。
虽然由于需要减少扩散,但****使用非常小的样品测试池(),但仍需尝试通过和传输增加光能来降低噪音。同时,****使用更快的采样速率和非常小的时间常数值,以适应UPLC产生的非常窄的色谱峰。ACQUITYUPLCTM采用新型光纤引导,TeflonAF池壁流动池;光程为10mm(与普通HPLC相同),体积仅为500nl(普通HPLC的20分之一)。光束通过光纤完全引入流动池后,利用Teflonaf的特性在不损失光能的情况下在池壁上折射;同时,速率达到40点/s。
该设计的高速检测器不仅适应了UPLC高速和高分辨率的特点,而且对UPLC灵敏度的提高也有很大的帮助。
优化系统综合性能设计。
WatersacquityultraperformanceLCTM系统的整体设计优化了超低系统体积和死亡体积,使UPLC能够成功实现必要的低扩散和高速检测带来的所有优势,充分利用质谱电喷离子接口的优势。因此,ACQuityuplCTM系统将是理想的质谱接口。
当我们连接质谱技术时,ACQUITYUPLCTM系统的解决方案可以提供更灵敏的LC/MS和LC/MS/MS分析。例如,当与MicromassLCTPremierTM连接时,数据的质量和速度都有了惊人的提高。
应用
由于超液相色谱(UPLC)是一个新兴领域,Waters的ACQUITYUPLCTM系统刚刚出现,因此仍然缺乏已发布的应用数据。与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度和分离度分别是HPLC的9倍、3倍和1.7倍。因此,UPLC的**个应用是代谢组学分析和其他生化领域。目前可以想到的其他应用领域也包括天然产品的分析。使用UPLC与Tof或Q-Tof等质谱探测器连接将极大地促进天然产品的发展,特别是中医药研究领域。
大多数生化样品和天然产品都非常复杂,无论有多少色谱峰可以分离,它们都会感觉不够。是HPLC和UPLC的比较。在相同的条件下,UPLC可以分离的色谱峰是HPLC的两倍多,因此我们可以进一步研究:保持分离,追求更快的分析速度,快的分析速度,同时制作更多的样品,或在同一时间优化更多的色谱峰。
是代谢产物分析的色谱图。在同样的条件下;UPLC的分辨率让我们认识到更多的色谱峰(质谱检测器-LCT)。

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