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液相色谱仪
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牛奶中氯霉素检测的固相萃取方法

作者:lcspy     发表时间:2016-11-15 13:43:41

牛奶中氯霉素检测的固相萃取方法

 

一、前言

氯霉素是一种抗生素,对伤寒、百日咳、肺炎等具有良好的**作用,但长期使用可引发再生障碍性贫血,因而监控其在动物源食品中的残留对开展畜产品检测及保障食品**工作有重大意义。

二、适用范围

适用于牛奶、奶粉中、的检测。

三、实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备


LC-3000有效液相色谱仪,紫外检测器,SPE固相萃取装置,氮气吹干仪,超声清洗仪,涡旋振荡仪,离心机。

试剂材料
浓缩奶;氯霉素标品;甲醇(色谱纯);乙腈(分析纯);乙酸乙酯(分析纯)。
色谱柱:C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm


四、样品提取

准确称取牛奶5 g(**到0.001),加入乙酸乙酯15 mL,涡旋振荡1 min,摇床振荡10 min。3000 r/min离心10 min。将上清转移至试管,于45 氮吹吹干,用5 mL乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)再溶解,超声10 min,待净化。


五、SPE柱净化


1)活化:C18固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水活化。

2)上样:将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中,以1 mL/min的流速过柱,弃去滤液。

3)淋洗:用4 mL×2次乙腈-水溶液(5 : 95,v/v)淋洗固相萃取柱,弃去淋洗液,抽干10 min。

4)洗脱:用8 mL乙酸乙酯洗脱固相萃取小柱,收集洗脱液。

5)重新溶解:洗脱液于45氮吹吹干,加1 mL乙腈-水溶液(2 : 8,v/v),超声10 min溶解,0.45 μm微孔滤膜过滤,供HPLC测定。

六、液相色谱条件

色 谱 柱:

C18(5 μm ,120 Å,4.6×250 mm,检 测 器:UV3000型紫外/可见光检测器

检测波长:UV 268 nm 

流 动 相:甲醇/水 = 60/40(v/v)          

流 速:0.8 mL/min

柱    温:25              
进 样 量:20 μL



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