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罂粟壳由于其具有兴奋、镇痛等麻醉作用,而且有成瘾性,所以一些火锅餐馆的经营者在火锅底料中加入罂粟壳以此来招揽生意,牟取暴利。因此**建立较有效的检测方法,制止这种违法行为。目前对罂粟壳的测定有薄层法、液相色谱法、气质联用法和毛细管电泳法等,而现有的测定方法中令人满意的方法不多。由于火锅汤料中的食物成分较多、组分十分复杂,所以我们山东鲁创分析仪器有限公司在参考有关文献资料…的基础上,经过大量的试验,建立了有效液相色谱法检测火锅汤料中罂粟壳成分的方法,为鉴别和分析罂粟壳成分提供可靠依据。
实验部分:
1.仪器LC-3000有效液相色谱仪;C18不锈钢柱(VP—ODS)150L×4.6;SPD一10AVP紫外检测器。
2.试剂
吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因、罂粟碱标准品,硅钨
空白试验
经实验表明,样品处理过程中加入的试剂除所
加乙醚有干扰峰外,其他不干扰待测组分的测定,但所加的乙醚经过烘箱60℃挥蒸2h后,即可消除干扰峰。
3.样品处理条件试验
由于火锅汤料中成分较复杂,又含有大量的脂肪和蛋白质,因此用硅钨酸沉淀生物碱前,**先除去这些成份,用石油醚除去脂肪,用三氯乙酸除去蛋白质,然后用硅钨酸沉淀生物碱,就可以拥有满意结果。
4.仪器分离条件选择经实验表明,只有当流动相nm
甲醇:水=98:2、柱温30℃、流速1.3ml/min、检测波长为216时,分离效果较好,可拥有满意图谱。
5.罂粟壳的鉴定酸、三氯乙酸、石油醚、乙醚、甲醇、氨水均为分析纯。
6.色谱条件
柱温:30℃;流动相:甲醇:水=98:2;流速:am。
mE/min;uV检测波长:216 罂粟壳中所含生物碱有20多种,主要是罂粟碱、码啡、那可丁、可待因、蒂巴因5种,5种物质的保留呈游离态的生物碱,多不溶于或难溶于水,而易溶于有机溶剂。生物碱可与酸结合生成盐,易溶于水,而不溶于有机溶剂中,生物碱的盐类在碱性溶液中,生物碱又会游离出来[2|。
7.标准品的测定
取少量罂粟碱、吗啡、可待因、那可丁、
8.汤料中罂粟壳的鉴定
在罂粟壳、汤料、汤料+罂粟壳3种试液的分析图谱中,罂粟壳提取液和汤料的色谱图明显不同,主要表现在主成份的保留时间、相对吸收峰面积上,而加有罂粟壳汤料的色谱图正好是罂粟壳提取液和汤料2个色谱图的叠加,说明汤料和罂粟壳的主要成分明显不同,这对罂粟壳的鉴定有重要意义。
取50ml汤料及50rIll加有罂粟壳的滤液,
蒂巴因标准品,分别加入1ml甲醇溶液,待检。
9.罂粟壳的前处理rain,过滤。滤液待检。
10.样品的检测
取适量罂粟壳加200ml水煮沸10
分别用10%HCI调节pH1.8—2.0,用50ml石油醚分离样品中脂肪,去掉醚层,将去除脂肪后的样液中加入20%三氯乙酸,10ml沉淀蛋白质,离心分离(4500r/min)20rain后,取上清液,加5%硅钨酸5ml摇匀,使沉淀作用完全,置沸水浴中加热5
放冷,离心分离(3000r/rain)使之沉淀完全.